Ферментный метод определения фосс
Медицинская теория, материалы / Токсикология / Ферментный метод определения фосс

Цель занятия:

освоить ферментный метод определения ФОСС.

Материальное обеспечение:

Раствор № 1. Берут 200 мг бромтимолового синего и растирают в ступке с 20 мл 0,1 н. раствора едкого натра до растворения. Синий раствор из ступки перено­сят в литровую мерную колбу. В нее вливают 50 мл 0,1 М раствора борной кислоты в 0,1 М растворе хлори­стого калия и доводят дистиллированной водой до 1 л. Раствор должен иметь интенсивно-синюю окраску и рН 8,4.

Раствор № 2. К 9,75 мл раствора № 1 добавляют 0,25 мл 0,1 н. раствора соляной кислоты. Раствор до­лжен иметь желтое окрашивание и рН 3,5.

Раствор Л£ 3. К 1,8 мл раствора № 1 добавляют 0,2 мл 1 %~ного раствора ацетилхолинхлорида (9:1).

Принцип метода

основан на определении интенсивности угнетения активности ацетилхолинэстеразы при инку­бации нормальной сыворотки крови лошади, экстракта из патматериала и раствора ацетилхолинхлорида. Сте­пень угнетения фермента устанавливают по изменению окраски бромтимолового синего под воздействием обра­зующейся уксусной кислоты от синей до зеленовато-желтой.

Ход анализа

. К 25 г измельченной навески до­бавляют 25 мл бензола и экстрагируют при помешива­нии в течение 1 ч. 0,025 мл экстракта микропипеткой вводят в уленгутовскую пробирку. Туда же добавляют 0,025 мл лошадиной сыворотки крови и 2 мл раствора № 3. Одновременно готовят колориметрический стан­дарт (раствор № 2) и контроль. В контрольную пробир­ку вместо экстракта заливают дистиллированную воду. По скорости изменения окраски от интенсивно-синего до желтого в пробирке с исследуемым экстрактом по срав­нению с контролем определяют наличие или отсутствие фосфорорганического пестицида в пробе.

Этот метод используют для определения остатков ДДВФ, диброма, циодрина; после концентрирования экстрактов — хлорофоса и амидофоса.

Смотрите также

Феноменология сексуальных дисфункций (расстройства сексуальных желаний, расстройства сексуальной активации, расстройства оргазма, сексуальные болевые расстройства)
F52 Половая дисфункция, не обусловленная органическим расстройством или заболеванием. G1. Больной не способен участвовать в половой жизни в соответствии со своим желанием. G2. Дисфункция име ...

Дифференциальная диагностика ГЭРБ и ИБС
...

Проблема объекта клинической психологии. Определение. Взаимосвязь социальной адаптации человека и его здоровья
Практическая ориентация клинической психологии. Клиническая психология является сегодня одной из наиболее внедренных в практику среди других областей психологии, внедренной методологически, метод ...